近日，复旦大学附属华山医院检验医学科关明教授课题组与中国科学院苏州生物医学工程技术研究所周连群教授课题组在国际著名杂志《Sensors & Actuators: B. Chemical》联合发表一篇题为“Establishment of scalable nanoliter digital LAMP technology for the quantitative detection of multiple myeloproliferative neoplasm molecular markers ”的论文，论文的第一作者为我院北院检验医学科的曹国君博士和中国科学院苏州生物医学工程技术研究所的李金泽博士，通讯作者为我院检验医学科的关明教授和中国科学院苏州生物医学工程技术研究所的周连群教授。

Ph染色体（费城染色体）阴性的经典骨髓增殖性肿瘤（MPN）是以一系或多系分化相对成熟的骨髓造血干细胞持续克隆性增殖为特征的血液疾病。随着分子生物学技术的迅速发展，越来越多的分子标志物被不断发现，根据世界卫生组织最新的MPN诊断标准，JAK2、MPL 和CALR三个基因的突变已被作为MPN诊断的重要参考指标。前期研究中关明教授课题组联合复旦大学化学系/上海速创诊断产品有限公司，基于微流控和环介导等温扩增技术开发了一款用于骨髓增殖性肿瘤分子标志物谱快速检测的芯片平台，该平台在60分钟内即可完成分子标志物的联合、快速检测，为经济条件落后地区、社区基层医院实施MPN早期快速筛查和鉴别诊断提供了便利，达到国际领先水平，相关成果已发表于著名分析化学杂志（Anal Chim Acta.2018;1024:123-135）。

图1 微流控芯片检测流程示意图

在前期研究基础上，关明教授课题组与周连群教授教授课题组“医-工”结合，将LAMP技术快速等温扩增的优势、微流控技术高通量的优势和数字PCR技术准确定量的优势进行整合，成功开发了一款数字LAMP检测平台（图1），并基于纳米粒子的特殊功能对现有的LAMP检测体系进行了改良，可在60分钟内实现骨髓增殖性肿瘤CALR-1、CALR-2和JAK2 V617F分子标志物的准确定量检测，检测灵敏度分别为0.5%、0.1%和0.5%突变水平。与现有的商业化数字PCR平台相比，本项目开发的数字LAMP平台具有检测成本低、检测速度快等优势（表1），具有良好的应用前景。

图2 数字LAMP检测流程示意图

表1 数字LAMP检测平台与商业化数字PCR平台的比较

论文信息：

Guojun Cao, Jinze Li, Zhifang Xing, Zhiqi Zhang, Wei Zhang, Chuanyu Li, Longhui Li, Zhen Guo, Shuli Li, Xu Gao, Yanchun Ma, Lianqun Zhou c, Ming Guan. Establishment of scalable nanoliter digital LAMP technology for the quantitative detection of multiple myeloproliferative neoplasm molecular markers. Sensors & Actuators: B. Chemical 346 (2021) 130493. 

https://doi.org/10.1016/j.snb.2021.130493.